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PCR儀的使用方法
2012-06-19
步驟：
1、開機(jī)：打開開關(guān)，視窗上顯示“SELF TEST”,顯示10秒中后，顯示RUN-ENTER菜單：
準(zhǔn)備執(zhí)行程序。
2、放入樣本管，關(guān)緊蓋子。
3、如果要運(yùn)行已經(jīng)編好的程序，則直接按《Proceed》，用箭頭鍵選擇已儲(chǔ)存的程序，按《Proceed》，則屏幕顯示：
按《Proceed》選擇ENABLE，則開始執(zhí)行程序。
4、如果要輸入新的程序，則在RUN-ENTER菜單上用箭頭鍵選擇ENTER PROGRAM,按《Proceed》，屏幕顯示
按《Proceed》，1)選擇NEW,命名新的程序，最多8個(gè)字母，輸入后按《Proceed》確認(rèn)(如何輸入字母、數(shù)字)。
2)輸入程序步驟：名字輸入后，顯示
按《Proceed》則可以輸入溫度(0～100℃)，按《Proceed》確認(rèn)后，則可以輸入孵育時(shí)間，用《Select》鍵移動(dòng)光標(biāo)，輸入數(shù)字，完成后按《Proceed》確認(rèn)，跳到下一步，輸入方式同上。
3)選擇GOTO，輸入循環(huán)步驟時(shí)鏈接到第幾步(循環(huán)數(shù)最多可達(dá)9999次)(為實(shí)際循環(huán)數(shù)-1)。
4) 選擇option,顯示
再選擇increment,按《Proceed》確認(rèn)，輸入初始的溫度，確認(rèn)后輸入時(shí)間，按《Proceed》確認(rèn)，然后輸入每個(gè)循環(huán)增加或減少的溫度，增加用正值，減少用負(fù)值(-0.1℃～6℃)，按《Proceed》確認(rèn)。
選擇extend, 按《Proceed》確認(rèn),輸入每個(gè)循環(huán)增加或減少的時(shí)間(-60～60秒)，按《Proceed》確認(rèn)。
選擇slop(指溫度上升或下降的速率),輸入溫度的改變值(-0.1～1.5℃)按《Proceed》確認(rèn)，然后輸入加熱或致冷的速度，按《Proceed》確認(rèn)。
4)選擇End,輸入結(jié)束步驟。
5、輸入完成的程序后，到RUN-ENTER菜單，選擇新程序，開始運(yùn)行。
6、其它：用《pause》可以暫停一個(gè)運(yùn)行的程序，再按一次繼續(xù)程序。
用《stop》或《Cancel》可停止運(yùn)行的程序。
編輯程序：
1、可以用《Cancel》鍵刪除輸錯(cuò)的值，輸入新的值后按《Proceed》確認(rèn)。
2、對(duì)于未輸完的程序，要先輸入END，按《Proceed》將程序儲(chǔ)存后才能刪除。
3、刪除已經(jīng)儲(chǔ)存的程序：從RUN-ENTER菜單中選擇RUN-PROGRAM，按《Proceed》，顯示主菜單，選擇DELET,用《Select》選擇刪除。
4、查看程序的步驟：在主菜單上選擇LIST，按《Proceed》，用《Select》將選擇名稱，再按《Proceed》，顯示程序的第一步，用《Select》鍵向前、向后翻頁(yè)查看，此時(shí)不能改變程序的值。
編輯已有的程序：
1、從RUN-ENTER菜單中選擇RUN-PROGRAM，按《Proceed》，顯示主菜單，選擇EDIT，按《Proceed》確認(rèn)，用《Select》鍵選擇要編輯的程序，按《Proceed》顯示程序的第一步。
2、用《Select》鍵將光標(biāo)移到要改變的溫度或循環(huán)的值上，鍵入新值，按《Proceed》確認(rèn)，按《Cancel》刪除鍵入的值，出現(xiàn)空格，鍵入新值后確認(rèn)。
注：一旦值被改變或刪除，原來(lái)的值不能恢復(fù)，必須重新鍵入。
3、編輯時(shí)間值：必須重新鍵入小時(shí)、分鐘、秒，按《Proceed》。
如何設(shè)置一個(gè)PCR體系：
一般分為8步：
1、預(yù)變性：可用94～95℃，2～10min,一般用5min。
2、變性：一般用94℃，30s~2min,一般45s~1min。
3、退火：溫度自定，30s~2min。
4、延伸：70～75℃，一般72℃，對(duì)于<2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。
5、循環(huán)數(shù)：一般25～35個(gè)循環(huán)。
6、最終延伸：72℃，5～15min。
7、保存：10℃，時(shí)間設(shè)為0。
8、END。
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